Page 22 - Revista TecnoAgro Nº 124
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tapas De la por ser una etapa esencial para los peratura de 121°C (250°F) duran-
mIcropropagacÍntrabajos de micropropagacín.te 15 minutos. El tiempo ḿnimo
para esterilizar el medio, aumenta
Para el establecimiento de cultivo de •Etapa I – Establecimiento de un cuando el volumen del ĺquido se
tejidos vegetales, existen 4 etapas cultivo aśptico. Debe desinfectar- eleva.
que consisten en:se el material vegetal, empleando
una solucín de hipoclorito de so- • Etapa II – Proliferacín de brotes.
• Etapa 0 – Seleccín y preparacín dio o hipoclorito de calcio con un El continuo sub-cultivo de proṕ-
de la planta madre. Hay que estar rango de concentracín de 1:4 a gulos tiene el proṕsito de obtener
atentos antes de iniciar el cultivo de 1:9. El uso de epicotilo de semillas el ńmero deseado de plantas, con
tejidos a la seleccín de las plantas germinadas aśpticamente, ayuda la aplicacín de balances hormo-
madre, y observar las siguientes a eliminar la contaminacín mi- nales en medios de cultivo, para la
caracteŕsticas: sanas, vigorosas crobiana, sin que se esterilicen de estimular la formacín de nuevas
y fuera de estŕs (es decir libres nuevo. La esterilizacín del instru- estructuras que originen plantas
de deiciencias o enfermedades mental y medios de cultivo, se usa nuevas.
por hongos o virus), para poder una autoclave operada con vapor
obtener ińculos de muy buena de baja presín, no excediendo 50 • Etapa III – Enraizamiento. Las
calidad. De las que se obtendŕn cm3 por contenido, a una presín pĺntulas y brotes obtenidos en la
cultivos libres de contaminacín yde vapor de 15lb in2 con una tem-etapa II son pequẽas, carentes
de ráces y no son capaces de so-
portar el crecimiento por si solas,
incluido el enraizamiento in vitro
antes de transferirse al suelo. Al-
gunas especies desarrollan ráces
adventicias en cultivo in vitro, por
lo que es necesario que los brotes
crezcan en tamão antes de indu-
cir la formacín de la ráz, en es-
pecial usando auxinas. Los brotes
a ocupar deben estar en buenas
condiciones, sin presentar vitriica-
cín alguna, ya que interiere con
el proceso de formacín de ráces.
• Etapa IV – Aclimatacín. Hay estar
atentos al momento de transferir
las pĺntulas al ambiente ex vitro,
de no hacerlo habŕ perdidas sig-
niicativas. Ya que los brotes se
desarrollaron en condiciones de
alta humedad y baja intensidad de
luz, las hojas de las pĺntulas en
estas condiciones, poseen menos
ceras epicuticulares que las culti-
vadas en invernadero o vivero, por
lo que pierden agua ŕpidamente
al ser cambiadas a condiciones
externas. Bastan algunos d́as pa-
ra que las plantas sean capaces
de producir su propio recurso de
carbono, pues al ser cultivadas in
vitro, son suplementadas con sa-
carosa y se mantienen con poca
luz, por lo que no dependen total-
mente de su fotośntesis.